MEDIOS DE CULTIVO Y REACTIVOS
4 Caldo de enriquecimiento Giolitti Cantoni
Composición:
Triptona 10 g
Extracto de carne 5 g
Extracto de levadura 5 g
Cloruro de litio 5 g
Manitol 20 g
Cloruro sódico 5 g
Glicina 1,20 g
Piruvato sódico 3 g
Agua destilada 1.000 mL
Disolver por calentamiento y agitación hasta ebullición. Ajustar el pH a 6,9 ± 0,2. Distribuir en tubos de 20 x 200 mm, a razón de 19 mL. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 20 minutos. Enfriar rápidamente y añadir, a cada tubo, 0,3 de una solución de telurito potásico al 3,5 por 100, esterilizada por filtración
Para la técnica del NMP; el medio se distribuye en tubos de 16 x 160 milímetros, a razón de 10 .
Parafina estéril
4 Medio sólido selectivo Baird Parker (B P)
Composición:
Triptona 10 g
Extracto de carne 5 g
Extracto de levadura 1 g
Piruvato sódico 10 g
Glicina 12 g
Cloruro de litio 5 g
Agar 20 g
Agua destilada 1.000 mL
Disolver por calentamiento y agitación. Ajustar el pH a 6,9 ± 0,2. Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 20 minutos. Enfriar a 50 ºC y añadir 50 de emulsión estéril yema de huevo-telurito (apartado siguiente). Mezclar uniformemente y preparar placas de Petri.
4 Emulsión de yema de huevo-telurito
Composición:
Emulsión de yema de huevo 50 g
Telurito potásico 3,5 por 100
Sulfametazina 0,2 por 100
Agua destilada 1.000 mL
La yema de huevo se prepara partiendo de huevos frescos de gallina, bien lavados y que hayan permanecido en alcohol al 70 por 100, entre 2-3 horas. Se ex-trae e] huevo asépticamente, y, de la misma forma, se separan las claras de las yemas. La emulsión se obtiene mezclando 50 mL de yema de huevo con la misma cantidad de solución salina estéril. La mezcla se homogeneiza en homogeneizador estéril.
La solución de telurito potásico al 3,5 por 100 se esteriliza por filtración.
Para preparar la solución de sulfametazina, se disuelven 0,5 g del producto puro en 25 mL de hidróxido sódico Ni] O, completando hasta 250 mL con agua destilada.
4 Caldo cerebro corazón (Brain Heart Infusión: BHI)
Composición:
Extracto de cerebro de ternera 12,50 g
Extracto de corazón de buey 5,00 g
Triptosa 10,00 g
Cloruro sódico 5,00 g
Fosfato disódico 2,50 g
Agua destilada 1.000 mL
Disolver por calentamiento y agitación. Ajustar el pH a 7,4 ± 0,2. Distribuir en tubos de ensayo a razón de 10 mL . Esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos.
4 Plasma de conejo con ácido Etilendiamino tetraacético (EDTA)
Plasma de conejo, desecado y titulado, que evita reacciones falsas en las pruebas de coagulasa.
Este producto se adquiere en casas comerciales.
4 Agar desoxirribonucleasa (DNsa)
Composición:
Triptona 20 g
Ácido desoxirribonucleico 2 g
Cloruro sódico 5 g
Agar 12 g
Agua destilada 1.000 mL
Disolver por calentamiento y agitación hasta ebullición. Ajustar el pH a 7 3 ± 0,2. Distribuir en tubos a razón de 15 mL y esterilizar en autoclave a 121 ºC durante 15 minutos. Preparar placas de Petri con el medio.
Ácido clorhídrico 1 N
Solución de azul de toluidina
Composición:
Azul de toluidina 1 g
Agua destilada 100mL
4 Agar DNasa azul de toluidina
Composición:
Ácido desoxirribonucleico 0,3
Cloruro mol/litro 10 g
Agar 10 cálcico 0,01 g
Tampón tris (0,05 mol/litro, pH 9) 1.000mL
Tampón tris
Composición:
Tris (hidroximetilamino metano) (0,5 M) 121,14 g Agua destilada 1.000
Disolver el tris en parte del agua destilada. Ajustar el pH a 9 con ácido clorhídrico concentrado. Completar con el resto del agua hasta 1.000 .
Medio completo
Disolver el medio agur DNsa por calentamiento y agitación hasta ebullición. Añadir 3mLde solución de azul de toluidina. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Distribuir en matraces estériles donde se pueda conservar el medio hasta su utilización, para preparar placas de Petri. Su conservación en estas condiciones es de 2-3 meses.
4 Equipo de coloración de Gram